Orisirisi awọn enzymu ti o wọpọ lo ninu awọn idanwo PCR

Iṣesi pq polymerase, abbreviated biPCRni ede Gẹẹsi, jẹ ilana ilana isedale molikula ti a lo lati ṣe alekun awọn ajẹkù DNA kan pato.O le ṣe akiyesi bi ẹda DNA pataki kan ni ita ara, eyiti o le mu iye DNA kekere kan pọ si pupọ.Nigba gbogboPCRilana ifaseyin, kilasi kan ti awọn nkan ṣe ipa pataki - awọn enzymu.

1. Taq DNA

Ni adanwo ni ibẹrẹ ọjọ tiPCR, Awọn onimo ijinlẹ sayensi lo Escherichia coli DNA polymerase I, Ṣugbọn iṣoro kan wa pẹlu henensiamu yii: o nilo lati tun kun enzymu tuntun ni gbogbo igba ti a ba ṣe iyipo, eyi ti o mu ki awọn igbesẹ iṣẹ naa ni idiju diẹ ati pe o ṣoro lati ni kikun laifọwọyi.Iṣoro yii ni a yanju lẹhin ti awọn onimo ijinlẹ sayensi ya sọtọ Taq DNA polymerase lairotẹlẹ lati Thermus aquaticus ni ọdun 1988. Lati igbanna, imudara laifọwọyi ti DNA ti di otito.Awari ti enzymu yii tun ṣePCRọna ẹrọ rọrun, ilowo ati imọ-ẹrọ gbogbo agbaye.Lọwọlọwọ, Taq DNA polymerase jẹ polymerase ti o wọpọ julọ ni awọn ohun elo DNA.

2. PfuDNA

Gẹgẹbi a ti sọ loke, Taq DNase ni kokoro nla kan, nitorinaa awọn onimo ijinlẹ sayensi ti ṣe atunṣe Taq DNA polymerase si iye kan lati yago fun imudara ti kii ṣe pato nitori aiṣedeede, ti o yọrisi awọn abajade idanwo ti ko pe.Ṣugbọn iyipada ti Taq DNA polymerase le ṣe idiwọ iṣẹ ṣiṣe ti DNA polymerase ni iwọn otutu yara.PfuDNA polymerase le ṣe atunṣe daradara fun awọn aila-nfani ti o wa loke ti Taq DNA polymerase, ki iṣesi PCR le ṣee ṣe ni deede, ati pe oṣuwọn aṣeyọri ti imudara jiini ibi-afẹde le ni ilọsiwaju daradara.

3. Yiyipada Transcriptase

Iyipada transcriptase ni a ṣe awari ni ọdun 1970. Enzymu yii nlo RNA gẹgẹbi awoṣe, dNTP gẹgẹbi sobusitireti, tẹle ilana ti sisọpọ ipilẹ, o si ṣajọpọ okun DNA kan ti o ni ibamu si awoṣe RNA ni itọsọna 5′-3′.Iyipada transcriptase jẹ nipataki ti o gbẹkẹle iṣẹ ṣiṣe DNA polymerase lati DNA tabi awọn awoṣe RNA ati nitorinaa ko ni iṣẹ 3′-5′ exonuclease.Bibẹẹkọ, o ni iṣẹ RNase H, eyiti o fi opin si ipari iṣelọpọ ti transcriptase yi pada si iwọn kan.Nitori iṣotitọ kekere ati iwọn otutu ti transcriptase yiyipada egan, awọn onimo ijinlẹ sayensi tun ṣe atunṣe rẹ.

FunPCRawọn adanwo, awọn ohun elo akọkọ jẹ: tube PCR kọọkan, tube PCR 4/8-rinhoho, awọn awo PCR.

Labio káPCR consumablesni awọn wọnyiawọn anfani:

PCR farahan: Gbooro gbona cycler ibamu;Iyatọ giga-giga, irọrun idanimọ daradara;daradara fluorescence otito; daragbigbe ooru;DNase ti a fọwọsi, RNase, DNA, awọn inhibitors PCR, ati idanwo pyrogen-free.

Olukuluku PCR tubes: Evaporation-sooro; daragbigbe ooru;wípé opiti o tayọ; DNase ti a fọwọsi, RNase, DNA, awọn inhibitors PCR, ati idanwo pyrogen-free.

4/8-awọn ila PCR ọpọn: Odi tinrin ultra; ijuwe giga; ifojusọna fluorescence ti o dara;le lo ni ile-iṣẹ elegbogi, ile-iṣẹ ounjẹ, ati isedale molikula; didara ga, ohun elo PP wundia; DNase ti a fọwọsi, RNase, DNA, awọn inhibitors PCR, ati idanwo pyrogen-free.